page_banner

Nova comprensió de la teràpia de plasma ric en plaquetes (PRP) - Part I

La teràpia cel·lular autòloga emergent que utilitza plasma ric en plaquetes (PRP) pot tenir un paper auxiliar en diversos plans de tractament de medicina regenerativa.Hi ha una demanda global no satisfeta d'estratègies de reparació de teixits per tractar pacients amb malalties musculoesquelètics (MSK) i de la columna vertebral, osteoartritis (OA) i ferides cròniques complexes i refractàries.La teràpia PRP es basa en el fet que el factor de creixement plaquetari (PGF) dóna suport a la cicatrització i la reparació de ferides en cascada (inflamació, proliferació i remodelació).S'han avaluat diverses formulacions de PRP a partir d'estudis humans, in vitro i animals.No obstant això, les recomanacions dels estudis in vitro i en animals solen conduir a resultats clínics diferents, ja que és difícil traduir els resultats de la investigació no clínica i les recomanacions de mètodes en tractament clínic humà.En els darrers anys s'ha avançat en la comprensió del concepte de tecnologia PRP i agents biològics, i s'han proposat noves instruccions d'investigació i noves indicacions.En aquesta revisió, parlarem dels últims avenços en la preparació i composició de PRP, incloent la dosi plaquetària, l'activitat leucòcita i la regulació immune innata i adaptativa, l'efecte de la 5-hidroxitriptamina (5-HT) i l'alleujament del dolor.A més, vam parlar del mecanisme PRP relacionat amb la inflamació i l'angiogènesi durant la reparació i regeneració dels teixits.Finalment, revisarem els efectes d'alguns fàrmacs sobre l'activitat del PRP.

 

El plasma autòleg ric en plaquetes (PRP) és la part líquida de la sang perifèrica autòloga després del tractament i la concentració de plaquetes és superior a la línia de base.La teràpia PRP s'ha utilitzat per a diverses indicacions durant més de 30 anys, donant lloc a un gran interès pel potencial del PRP autògen en medicina regenerativa.El terme agent biològic ortopèdic s'ha introduït recentment per tractar malalties musculoesquelètics (MSK) i ha aconseguit resultats prometedors en la capacitat de regeneració de mescles heterogènies de cèl·lules bioactives PRP.Actualment, la teràpia amb PRP és una opció de tractament adequada amb beneficis clínics, i els resultats dels pacients reportats són encoratjadors.Tanmateix, la inconsistència dels resultats dels pacients i les noves idees han plantejat reptes per a la viabilitat de l'aplicació clínica del PRP.Un dels motius pot ser el nombre i la variabilitat dels sistemes PRP i tipus PRP al mercat.Aquests dispositius són diferents pel que fa al volum de recollida de PRP i l'esquema de preparació, donant com a resultat característiques i agents biològics únics del PRP.A més, la manca de consens sobre l'estandardització de l'esquema de preparació de PRP i l'informe complet d'agents biològics en aplicació clínica va provocar resultats inconsistents dels informes.S'han fet molts intents per caracteritzar i classificar el PRP o els productes derivats de la sang en aplicacions de medicina regenerativa.A més, s'han proposat derivats plaquetaris, com els lisats de plaquetes humanes, per a la investigació ortopèdica i in vitro amb cèl·lules mare.

 

Un dels primers comentaris sobre el PRP es va publicar l'any 2006. El focus principal d'aquesta revisió és la funció i el mode d'acció de les plaquetes, l'efecte del PRP en cada etapa de la cascada de curació i el paper bàsic del factor de creixement derivat de les plaquetes. en diverses indicacions de PRP.En les primeres fases de la investigació del PRP, el principal interès en el PRP o el PRP-gel era l'existència i les funcions específiques de diversos factors de creixement plaquetari (PGF).

 

En aquest article, parlarem àmpliament de l'últim desenvolupament de diferents estructures de partícules de PRP i receptors de membrana cel·lular plaquetària i els seus efectes sobre la regulació immune del sistema immunitari innat i adaptatiu.A més, es comentarà amb detall el paper de les cèl·lules individuals que poden existir en el vial de tractament de PRP i la seva influència en el procés de regeneració dels teixits.A més, es descriuen els últims avenços en la comprensió dels agents biològics de PRP, la dosi de plaquetes, els efectes específics de glòbuls blancs específics i els efectes de la concentració de PGF i les citocines sobre els efectes nutricionals de les cèl·lules mare mesenquimals (MSC), inclòs el PRP dirigit a diferents entorns cel·lulars i teixits després de la transducció del senyal cel·lular i els efectes paracrins.De la mateixa manera, parlarem del mecanisme PRP relacionat amb la inflamació i l'angiogènesi durant la reparació i regeneració dels teixits.Finalment, revisarem l'efecte analgèsic del PRP, l'efecte d'alguns fàrmacs sobre l'activitat del PRP i la combinació de PRP i programes de rehabilitació.

 

Principis bàsics de la teràpia clínica amb plasma ric en plaquetes

Els preparats de PRP són cada cop més populars i s'utilitzen àmpliament en diversos camps mèdics.El principi científic bàsic del tractament amb PRP és que la injecció de plaquetes concentrades al lloc lesionat pot iniciar la reparació del teixit, la síntesi de nou teixit connectiu i la reconstrucció de la circulació sanguínia alliberant molts factors biològicament actius (factors de creixement, citocines, lisosomes) i proteïnes d'adhesió responsables d'iniciar la reacció en cascada hemostàtica.A més, les proteïnes plasmàtiques (per exemple, fibrinogen, protrombina i fibronectina) estan presents en components plasmàtics pobres en plaquetes (PPP).El concentrat de PRP pot estimular l'alliberament hiperfisiològic de factors de creixement per iniciar la curació de lesions cròniques i accelerar el procés de reparació de lesions agudes.En totes les etapes del procés de reparació dels teixits, una varietat de factors de creixement, citocines i reguladors d'acció local promouen les funcions cel·lulars més bàsiques mitjançant mecanismes endocrins, paracrins, autòcrins i endocrins.Els principals avantatges del PRP inclouen la seva seguretat i l'enginyosa tecnologia de preparació dels actuals equips comercials, que es poden utilitzar per preparar agents biològics que es poden utilitzar àmpliament.El més important, en comparació amb els corticoides comuns, el PRP és un producte autògen sense efectes secundaris coneguts.Tanmateix, no hi ha una regulació clara sobre la fórmula i la composició de la composició de PRP injectable, i la composició de PRP té grans canvis en plaquetes, contingut de glòbuls blancs (WBC), contaminació de glòbuls vermells (RBC) i concentració de PGF.

 

Terminologia i classificació PRP

Durant dècades, el desenvolupament de productes PRP utilitzats per estimular la reparació i regeneració de teixits ha estat un camp de recerca important de biomaterials i ciència de fàrmacs.La cascada de curació dels teixits inclou molts participants, incloses plaquetes i els seus factors de creixement i grànuls de citocines, glòbuls blancs, matriu de fibrina i moltes altres citocines sinèrgiques.En aquest procés en cascada, es produirà un procés complex de coagulació, que inclou l'activació plaquetària i la posterior densificació i α- L'alliberament del contingut de les partícules plaquetàries, l'agregació de fibrinogen (alliberat per les plaquetes o lliure en plasma) a la xarxa de fibrina i la formació d'embòlia plaquetària.

 

El PRP "universal" simula l'inici de la curació

Al principi, el terme "plasma ric en plaquetes (PRP)" s'anomenava concentrat de plaquetes utilitzat en la medicina de transfusió de sang, i encara s'utilitza avui dia.Inicialment, aquests productes PRP només s'utilitzaven com a adhesiu de teixit de fibrina, mentre que les plaquetes només s'utilitzaven per donar suport a una polimerització de fibrina més forta per millorar el segellat dels teixits, en lloc d'estimular la curació.Després d'això, es va dissenyar la tecnologia PRP per simular l'inici de la cascada de curació.Posteriorment, la tecnologia PRP es va resumir a través de la seva capacitat per introduir i alliberar factors de creixement al microambient local.Aquest entusiasme pel lliurament de PGF sovint amaga el paper important d'altres components en aquests derivats de la sang.Aquest entusiasme s'intensifica encara més per la manca de dades científiques, les creences místiques, els interessos comercials i la manca d'estandardització i classificació.

La biologia del concentrat de PRP és tan complexa com la sang mateixa i pot ser més complexa que les drogues tradicionals.Els productes PRP són biomaterials vius.Els resultats de l'aplicació clínica de PRP depenen de les característiques intrínseques, universals i adaptatives de la sang del pacient, incloent diversos altres components cel·lulars que poden existir a la mostra de PRP i el microambient local del receptor, que pot estar en estat agut o crònic.

 

Resum de terminologia PRP confusa i sistema de classificació proposat

Durant molts anys, els professionals, els científics i les empreses s'han vist afectats pel malentès inicial i els defectes dels productes PRP i els seus diferents termes.Alguns autors van definir el PRP com a només plaquetes, mentre que altres van assenyalar que el PRP també conté glòbuls vermells, diversos glòbuls blancs, fibrina i proteïnes bioactives amb una concentració augmentada.Per tant, s'han introduït molts agents biològics PRP diferents a la pràctica clínica.És decebedor que la literatura normalment no tingui una descripció detallada dels agents biològics.El fracàs de l'estandardització de la preparació del producte i el desenvolupament posterior del sistema de classificació va portar a l'ús d'un gran nombre de productes PRP descrits per diferents termes i abreviatures.No és d'estranyar que els canvis en les preparacions de PRP condueixin a resultats inconsistents dels pacients.

 

Kingsley va utilitzar per primera vegada el terme "plasma ric en plaquetes" l'any 1954. Molts anys després, Ehrenfest et al.Es va proposar el primer sistema de classificació basat en tres variables principals (contingut de plaquetes, leucòcits i fibrina), i molts productes de PRP es van dividir en quatre categories: P-PRP, LR-PRP, fibrina rica en plaquetes pura (P-PRF) i leucòcits. PRF ric (L-PRF).Aquests productes es preparen mitjançant un sistema tancat totalment automàtic o protocol manual.Mentrestant, Everts et al.Es va destacar la importància d'esmentar els glòbuls blancs en les preparacions de PRP.També recomanen l'ús de terminologia adequada per indicar versions inactives o activades de preparats de PRP i gel de plaquetes.

Delong et al.va proposar un sistema de classificació PRP anomenat plaquetes, glòbuls blancs activats (PAW) basat en el nombre absolut de plaquetes, incloent quatre rangs de concentració de plaquetes.Altres paràmetres inclouen l'ús d'activadors plaquetaris i la presència o absència de glòbuls blancs (és a dir, neutròfils).Mishra et al.Es proposa un sistema de classificació similar.Uns anys més tard, Mautner i els seus col·legues van descriure un sistema de classificació (PLRA) més elaborat i detallat.L'autor va demostrar que és important descriure el recompte absolut de plaquetes, el contingut de glòbuls blancs (positiu o negatiu), el percentatge de neutròfils, RBC (positiu o negatiu) i si s'utilitza l'activació exògena.El 2016, Magalon et al.Es va publicar la classificació DEPA basada en la dosi d'injecció de plaquetes, l'eficiència de producció, la puresa del PRP obtingut i el procés d'activació.Posteriorment, Lana i els seus col·legues van introduir el sistema de classificació MARSPILL, centrat en les cèl·lules mononuclears de sang perifèrica.Recentment, el Comitè d'Estandardització Científica va defensar l'ús del sistema de classificació de la Societat Internacional de Trombosi i Hemostàsi, que es basa en una sèrie de recomanacions de consens per estandarditzar l'ús de productes plaquetaris en aplicacions de medicina regenerativa, inclosos els productes plaquetaris congelats i descongelats.

A partir del sistema de classificació de PRP proposat per diversos professionals i investigadors, molts intents infructuosos d'estandarditzar la producció, definició i fórmula de PRP que han d'utilitzar els metges poden arribar a una conclusió justa, que és probable que no succeeixi en els propers anys. , la tecnologia dels productes de PRP clínic continua desenvolupant-se, i les dades científiques mostren que es necessiten diferents preparats de PRP per tractar diferents patologies en condicions específiques.Per tant, esperem que els paràmetres i variables de la producció ideal de PRP continuïn creixent en el futur.

 

El mètode de preparació de PRP està en curs

Segons la terminologia de PRP i la descripció del producte, es publiquen diversos sistemes de classificació per a diferents formulacions de PRP.Malauradament, no hi ha consens sobre el sistema de classificació integral de PRP o qualsevol altre sang i productes sanguinis autòlegs.Idealment, el sistema de classificació hauria de prestar atenció a diverses característiques del PRP, definicions i nomenclatura adequada relacionades amb les decisions de tractament dels pacients amb malalties específiques.Actualment, les aplicacions ortopèdiques divideixen el PRP en tres categories: fibrina pura rica en plaquetes (P-PRF), PRP rica en leucòcits (LR-PRP) i PRP deficient en leucòcits (LP-PRP).Tot i que és més específic que la definició general del producte PRP, les categories LR-PRP i LP-PRP òbviament no tenen cap especificitat en el contingut de glòbuls blancs.A causa dels seus mecanismes de defensa immune i hoste, els glòbuls blancs han afectat molt la biologia intrínseca de les malalties cròniques dels teixits.Per tant, els agents biològics PRP que contenen glòbuls blancs específics poden promoure significativament la regulació immune i la reparació i regeneració dels teixits.Més concretament, els limfòcits són abundants en PRP, produint un factor de creixement semblant a la insulina i donant suport a la remodelació dels teixits.

Els monòcits i els macròfags tenen un paper clau en el procés de regulació immune i el mecanisme de reparació dels teixits.La importància dels neutròfils en el PRP no està clara.LP-PRP es va determinar com la primera preparació de PRP mitjançant una avaluació sistemàtica per aconseguir resultats efectius del tractament de l'OA articular.Tanmateix, Lana et al.S'oposa l'ús de LP-PRP en el tractament de l'OA del genoll, la qual cosa indica que els glòbuls blancs específics tenen un paper important en el procés inflamatori abans de la regeneració del teixit, perquè alliberen molècules proinflamatòries i antiinflamatòries.Van trobar que la combinació de neutròfils i plaquetes activades tenia més efectes positius que efectes negatius sobre la reparació dels teixits.També van assenyalar que la plasticitat dels monòcits és important per a la funció no inflamatòria i reparadora en la reparació dels teixits.

L'informe de l'esquema de preparació de PRP en investigació clínica és molt inconsistent.La majoria dels estudis publicats no han proposat el mètode de preparació de PRP necessari per a la repetibilitat de l'esquema.No hi ha un consens clar entre les indicacions de tractament, per la qual cosa és difícil comparar els productes PRP i els resultats del tractament relacionats.En la majoria dels casos reportats, la teràpia de concentració plaquetària es classifica sota el terme "PRP", fins i tot per a la mateixa indicació clínica.Per a alguns camps mèdics (com l'OA i la tendinosi), s'ha avançat en la comprensió dels canvis de les preparacions de PRP, les vies de lliurament, la funció plaquetària i altres components de PRP que afecten la reparació i regeneració dels teixits.No obstant això, es necessiten més investigacions per arribar a un consens sobre la terminologia PRP relacionada amb els agents biològics de PRP per tal de tractar de manera completa i segura determinades patologies i malalties.

 

Estat del sistema de classificació PRP

L'ús de la bioteràpia de PRP autòloga es veu preocupat per l'heterogeneïtat de les preparacions de PRP, la denominació inconsistent i la poca estandardització de les directrius basades en l'evidència (és a dir, hi ha molts mètodes de preparació per produir vials de tractament clínic).Es pot predir que el contingut absolut de PRP, la puresa i les característiques biològiques del PRP i els productes relacionats varien molt i afecten l'eficàcia biològica i els resultats dels assaigs clínics.La selecció del dispositiu de preparació de PRP introdueix la primera variable clau.En medicina regenerativa clínica, els professionals poden utilitzar dos equips i mètodes diferents de preparació de PRP.Una preparació utilitza un separador de cèl·lules sanguínies estàndard, que funciona amb la sang completa recollida per si mateix.Aquest mètode utilitza tecnologia de separació de tambor o disc de centrífuga de flux continu i passos de centrífuga dura i suau.La majoria d'aquests dispositius s'utilitzen en cirurgia.Un altre mètode és utilitzar tecnologia i equips centrífugs per gravetat.La centrifugació d'alta força G s'utilitza per separar la capa groga d'ESR de la unitat de sang que conté plaquetes i glòbuls blancs.Aquests dispositius de concentració són més petits que els separadors de cèl·lules sanguínies i es poden utilitzar al costat del llit.En diferència ģ: la força i el temps de centrifugació donen lloc a diferències significatives en el rendiment, concentració, puresa, viabilitat i estat activat de plaquetes aïllades.Molts tipus d'equips comercials de preparació de PRP es poden utilitzar en aquesta darrera categoria, donant lloc a més canvis en el contingut del producte.

La manca de consens sobre el mètode de preparació i la validació del PRP continua conduint a la inconsistència del tractament amb PRP, i hi ha grans diferències en la preparació del PRP, la qualitat de la mostra i els resultats clínics.S'ha verificat i registrat l'equip PRP comercial existent segons les especificacions del fabricant propietari, que resol les diferents variables entre els equips PRP disponibles actualment.

 

Comprendre la dosi de plaquetes in vitro i in vivo

L'efecte terapèutic del PRP i altres concentrats de plaquetes prové de l'alliberament de diversos factors implicats en la reparació i regeneració dels teixits.Després de l'activació de les plaquetes, les plaquetes formaran un trombe plaquetari, que servirà com a matriu extracel·lular temporal per afavorir la proliferació i diferenciació cel·lular.Per tant, és just suposar que una dosi de plaquetes més alta conduirà a una concentració local més alta de factors bioactius plaquetaris.Tanmateix, la correlació entre la dosi i la concentració de plaquetes i la concentració del factor de creixement bioactiu de les plaquetes alliberades i el fàrmac pot ser incontrolable, perquè hi ha diferències significatives en el recompte de plaquetes basal entre pacients individuals i hi ha diferències entre els mètodes de preparació de PRP.De la mateixa manera, diversos factors de creixement de plaquetes implicats en el mecanisme de reparació del teixit estan presents a la part plasmàtica del PRP (per exemple, el factor de creixement del fetge i el factor de creixement semblant a la insulina 1).Per tant, una dosi de plaquetes més alta no afectarà el potencial de reparació d'aquests factors de creixement.

La investigació PRP in vitro és molt popular perquè els diferents paràmetres d'aquests estudis es poden controlar amb precisió i els resultats es poden obtenir ràpidament.Diversos estudis han demostrat que les cèl·lules responen al PRP de manera dependent de la dosi.Nguyen i Pham van demostrar que concentracions molt altes de GF no eren necessàriament favorables al procés d'estimulació cel·lular, que podria ser contraproduent.Alguns estudis in vitro han demostrat que les concentracions elevades de PGF poden tenir efectes adversos.Una de les raons pot ser el nombre limitat de receptors de membrana cel·lular.Per tant, un cop el nivell de PGF sigui massa alt en comparació amb els receptors disponibles, tindran un impacte negatiu en la funció cel·lular.

 

Importància de les dades de concentració plaquetària in vitro

Tot i que la investigació in vitro té molts avantatges, també té alguns desavantatges.In vitro, a causa de la interacció contínua entre molts tipus de cèl·lules diferents en qualsevol teixit a causa de l'estructura del teixit i el teixit cel·lular, és difícil replicar in vitro en un entorn de cultiu únic bidimensional.La densitat cel·lular que pot afectar la via del senyal cel·lular sol ser inferior a l'1% de l'estat del teixit.El teixit del plat de cultiu bidimensional impedeix que les cèl·lules estiguin exposades a la matriu extracel·lular (ECM).A més, la tecnologia de cultiu típica donarà lloc a l'acumulació de residus cel·lulars i al consum continu de nutrients.Per tant, el cultiu in vitro és diferent de qualsevol condició d'estat estacionari, subministrament d'oxigen dels teixits o intercanvi sobtat de medi de cultiu, i s'han publicat resultats contradictoris, comparant l'efecte clínic del PRP amb l'estudi in vitro de cèl·lules específiques, tipus de teixit i plaquetes. concentracions.Graziani i altres.Es va trobar que in vitro, el major efecte sobre la proliferació d'osteoblasts i fibroblasts es va aconseguir a la concentració de plaquetes de PRP 2,5 vegades superior al valor inicial.En canvi, les dades clíniques proporcionades per Park i els seus col·legues van mostrar que després de la fusió espinal, el nivell de plaquetes de PRP s'ha d'augmentar més de 5 vegades que la línia de base per induir resultats positius.També es van informar de resultats contradictoris similars entre les dades de proliferació del tendó in vitro i els resultats clínics.

 

 

 

(Els continguts d'aquest article es reimprimeixen i no oferim cap garantia expressa o implícita sobre l'exactitud, fiabilitat o exhaustivitat dels continguts d'aquest article, i no som responsables de les opinions d'aquest article, si us plau, entengueu-ho.)


Hora de publicació: 01-mar-2023